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高粱黑粉菌蛋白提取工艺条件、佳温度

   日期:2021-10-02     来源:农业科技与装备    作者:鲁明 史琳 付欣    浏览:191    
核心提示:高粱黑粉菌蛋白是一類重要的活性物质。以高粱黑粉菌为原料,通过单因素试验和响应面试验,优化碱提—酸沉法提取高粱黑粉菌蛋白的工艺条件。结果表明:在料液比1∶8、提取温度20℃及NaOH溶液pH值8的条件下,高粱黑粉菌蛋白提取率达到0.3%。 原文链接:https://www.xianjichina.com/news/details_281593.html 来源:贤集网 著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权,非商业转载请注明出处。
     高粱黑粉菌蛋白是一类重要的活性物质,具有一定的降脂作用,开发前景广阔。本课题以高粱黑粉菌为原料,采用碱提—酸沉法提取高粱黑粉菌蛋白,通过单因素试验和响应面试验确定佳提取工艺,以期为高粱黑粉菌功能性物质开发研究提供依据。


1、材料与方法


1.1材料与试剂


高粱黑粉菌菌粉:采集于辽宁省农业科学院国家高粱改良中心基地;透析袋。


Tris(分析纯),NaOH,HCl,碳酸氢钠,EDTA。


1.2仪器与设备


UV-1600型紫外可见分光光度计:北京瑞利分析仪器公司;RE-52型旋转蒸发仪:上海亚荣仪器有限公司;SHZ-IIIB型循环水真空泵:河南巩义科学仪器有限公司;pHS-25型酸度计:上海理达仪器厂;TGL-15B高速冷冻离心机:上海安亭科学仪器厂。


1.3试验方法


1.3.1高粱黑粉菌蛋白的提取采用碱提—酸沉法提取高粱黑粉菌蛋白。将高粱黑粉菌磨成粉末状,先后用100目和60目筛过滤,取40 g,与蒸馏水以料液比


1∶10(m/V)比例混合,以1 mol/L的NaOH调节pH值,于室温下磁力搅拌30 min。将混合液以8 000 r/min离心10 min,收集上清液,重复2次。合并上清液,以1 mol/L的HCL溶液调节pH值为4.6,静置过夜。以8 000 r/min离心10 min,收集沉淀,用5倍水洗3遍,调节pH值至中性后,于4℃下用6-8KD透析袋透析72 h。于真空冷冻干燥机中冷冻干燥后,得到高粱黑粉菌蛋白干燥粉末0.12 g,置于4℃冰箱保存。


1.3.2单因素试验分别考察料液比(1∶8,1∶9,1∶10)、提取温度(15,20,25℃)和NaOH溶液pH值(7,8,9)对高粱黑粉菌蛋白提取率的影响。


1.3.3响应面优化试验根据单因素试验结果,选取料液比、提取温度、NaOH溶液pH值3个因素设计响应面试验(见表1)。

高粱黑粉菌蛋白提取工艺条件、佳温度

1.3.4高粱黑粉菌蛋白含量的测定采用考马斯亮蓝法测定蛋白含量。测定波长为600 nm,蒸馏水调零,重复3次,根据标准曲线计算高粱黑粉菌中蛋白含量。


1.4数据处理


利用SAS和Excel 2019软件进行数据分析。


2、结果与分析


2.1料液比对蛋白提取率的影响


不同料液比下高粱黑粉菌蛋白提取率如图1所示。

高粱黑粉菌蛋白提取工艺条件、佳温度

由图1可以看出:随着料液比的增加,蛋白含量逐渐升高。确定适料液比为1∶10。


2.2提取温度对蛋白提取率的影响


不同提取温度下高粱黑粉菌蛋白提取率如图2所示。

高粱黑粉菌蛋白提取工艺条件、佳温度

由图2可以看出:随着提取温度的升高,蛋白含量先升高再降低。确定适提取温度为20℃。


2.3 NaOH溶液pH值对蛋白提取率的影响


不同NaOH溶液pH值下高粱黑粉菌蛋白提取率如图3所示。


由图3可以看出:随着NaOH溶液pH值的升高,蛋白含量先升高后降低。确定适NaOH溶液pH值为8。


2.4提取工艺优化


响应面试验结果见表2。


由表2可知:佳提取条件为料液比1∶8,提取温度20℃,NaOH溶液pH值8;此条件下高粱黑粉菌蛋白提取率可达0.30%。


3、结论


以高粱黑粉菌为原料,采用碱提酸沉法提取粗蛋白后,通过单因素试验和响应面试验得到的佳提取条件为:料液比1∶8,NaOH溶液pH值8,20℃下磁力搅拌30 min。此条件下高粱黑粉菌蛋白提取率可达0.3%。


参考文献


[1]鲁明,石太渊,付欣,等.高粱黑粉菌的研究进展与开发前景[J].农业经济,2020(6):27-28.


[2]石太渊,姜福林,王小鹤,等.高粱丝黑穗病菌营养成分分析及评价[J].食品科技,2007,35(12):232-235.


[3]石太渊,于淼,鲁明,等.高粱黑粉菌黑色素生成机理及其功能研究[J].农业科技与装备,2013,23(8):56-58.

 
 
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